基于CRISPR技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)芽孢桿菌基因的快速敲除點(diǎn)突變大片段插入刪除以及過表達(dá)等，從而實(shí)現(xiàn)定制化工程菌株的改造這一技術(shù)為提升目的蛋白的產(chǎn)量?jī)?yōu)化工業(yè)生產(chǎn)流程提供了有力支持綜上所述，CRISPRCas9系統(tǒng)在芽孢桿菌中展現(xiàn)出了廣泛的應(yīng)用前景和巨大的潛力通過這一技術(shù)，研究者可以實(shí)現(xiàn)對(duì)芽孢桿菌的高效基因編輯精準(zhǔn)單堿基編輯蛋白原位定向進(jìn)化工程菌株改造以。

Myd88是免疫反應(yīng)的核心基因，敲除該基因的小鼠處于免疫受損狀態(tài)，無法正常生產(chǎn)腸道IgA，而IgA對(duì)腸道菌群的多樣性至關(guān)重要IgA可以粘附在腸道細(xì)菌表面，幫助細(xì)菌在腸道內(nèi)定植IgA的輕微減少都會(huì)讓腸道菌群多樣性受損在Myd88基因敲除的小鼠中，IgA無法正確靶向梭狀芽孢桿菌，導(dǎo)致脫硫弧菌過度生長(zhǎng)，進(jìn)而引發(fā)肥。

在基礎(chǔ)研究方面，溫廷益教授運(yùn)用代謝工程理論，通過基因敲除等手段進(jìn)行分子育種，進(jìn)行定向的分子進(jìn)化研究，旨在精確調(diào)控微生物的代謝功能他利用基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行對(duì)比分析，探究氨基酸和核苷等物質(zhì)代謝調(diào)控的深層次機(jī)制此外，他還借助生物信息學(xué)工具，研究代謝途徑中基因突變與代謝流的相互影響，揭示其。

通過基因編輯，實(shí)現(xiàn)外源基因的插入內(nèi)源基因敲除以及關(guān)鍵基因的表達(dá)調(diào)控同源重組系統(tǒng)是大腸桿菌基因組編輯技術(shù)的基礎(chǔ)，其中Red同源重組系統(tǒng)最為常用基于Red同源重組系統(tǒng)，結(jié)合不同的策略，開發(fā)出了無抗性的基因組編輯技術(shù)，如基于Flp重組酶的兩步同源重組基于sacB基因的兩步正負(fù)篩選法以及基于CRISPRCas9。

其中，基因表達(dá)調(diào)控技術(shù)，如單基因調(diào)控多基因調(diào)控和基因動(dòng)態(tài)調(diào)控，對(duì)于提高代謝途徑效率至關(guān)重要枯草芽孢桿菌作為具有GRAS特性的細(xì)菌，近年來被改造成為細(xì)胞工廠，用于生產(chǎn)α淀粉酶β環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶l天冬酰胺酶納豆激酶等工業(yè)酶，以及核黃素等產(chǎn)品呂雪芹等的研究介紹了枯草芽孢桿菌在代謝。

1抗蟲棉 抗蟲棉之所以抗蟲，是因?yàn)橥庠碆t基因整合到棉株體中后，可以在棉株體合成一種叫δ內(nèi)毒素的伴孢晶體，該晶體是一種蛋白質(zhì)晶體，被鱗翅目等敏感昆蟲的幼蟲吞食后，在其腸道堿性條件和酶的作用下，或單純?cè)趬A性條件下，伴孢晶體能水解成毒性肽，并很快發(fā)生毒性2環(huán)境保護(hù)上 “DNA探針”。

天津市攻關(guān)培育項(xiàng)目乳酸芽孢桿菌粉劑的中試，天津市攻關(guān)計(jì)劃秸桿飼料發(fā)酵劑中試生產(chǎn)及應(yīng)用，天津市攻關(guān)計(jì)劃紅棗提取藥用成分環(huán)磷酸腺苷及副產(chǎn)品深加工技術(shù)研究，天津市重點(diǎn)培育項(xiàng)目根霉產(chǎn)溶栓劑分離提取及體內(nèi)試驗(yàn)，天津市自然基金重點(diǎn)項(xiàng)目Sr絲狀真菌殺線蟲劑發(fā)酵工藝優(yōu)化與分離提取，天津市科技攻關(guān)項(xiàng)目。

蘇云金芽孢桿菌等多數(shù)細(xì)菌中實(shí)現(xiàn)基因敲除，但對(duì)于真菌的基因敲除卻存在一定難度，并不能廣泛適用1213因此，Red重組系統(tǒng)介。

Wong等1991對(duì)枯草芽孢桿菌168中的6個(gè)蛋白酶基因敲除后，得到了WB600菌株，該菌株在進(jìn)行異源蛋白表達(dá)時(shí)有助于目標(biāo)蛋白。

首次為枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis提供了一個(gè)高質(zhì)量的代謝網(wǎng)絡(luò)模型該模型不僅能夠準(zhǔn)確預(yù)測(cè)基因敲除對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，還。

來證明枯草芽孢桿菌是否對(duì) SeIV 的還原作用，并通過 SEM 和 FTIR 光譜進(jìn)行了的eNPs 定位和表征通過轉(zhuǎn)錄組和基因敲除與回補(bǔ)。

得到重組地衣芽孢桿菌BN11PFYAK同時(shí)將編碼D乳酸脫氫酶的ldhTi基因敲除，防止碳通量流向D乳酸，得到重組地衣芽孢桿菌BLA。

枯草芽孢桿菌的麥芽糖代謝涉及兩個(gè)主要途徑glv操縱子包括三個(gè)基因和由9個(gè)基因組成的多基因簇圖7A，glvA和mdxlk的下調(diào)顯著。

因此認(rèn)為這是導(dǎo)致枯草芽孢桿菌細(xì)胞自溶的關(guān)鍵基因研究人員以這7個(gè)基因作為敲除靶點(diǎn)，共構(gòu)建127株自溶基因缺失菌株其中xpf。

以枯草芽孢桿菌168為起始菌株，通過理性基因敲除和適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)室進(jìn)化，構(gòu)建了快速生長(zhǎng)菌株與原始菌株相比，生長(zhǎng)速率增加5469。